利用模拟酶催化显色和等温核酸扩增反应检测特定序列DN
http://www.testrust.com 来源:分析化学期刊 时间:2014-03-07
基于血红素(Hemin)与G鄄四联体(G4)所形成模拟酶的催化作用,结合等温指数扩增反应(IEX鄄PAR),建立了特定序列DNA的显色检测方法。目标DNA引发IEXPAR,通过设计模板序列,IEXPAR产生大量富含鸟嘌呤的单链DNA,在K+存在时,该单链DNA可形成G4结构,G4可以与Hemin结合形成具有过氧化物酶活性的模拟酶(Hemin鄄G4),Hemin鄄G4催化H2 O2氧化2,2鄄联氮鄄二(3鄄乙基鄄苯并噻唑鄄6鄄磺酸)二铵盐(ABTS),使体系颜色发生变化,反应产物最大吸收波长为421 nm。对显色反应体系中的实验参数进行了优化,包括Hemin浓度、ABTS浓度、H2 O2浓度、IEXPAR时间和显色反应时间。在最佳条件下,所建立的体系可以简便、快速检测0. 1 ~10 nmol/ L的目标DNA分子,且本方法能够很好地区分单个碱基的差别,具有良好的特异性。
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