检测认证人脉交流通讯录
- 货 号：
P0130
名 称：
BCA蛋白浓度测定试剂盒
规 格：
500微孔
价 格：
280.00
CAS #：
BCA蛋白浓度测定试剂盒使用说明
试剂盒组成
包装(500微孔)
保存
BCA试剂
100ml
2-8℃
Cu试剂
3ml
2-8℃
PBS稀释液
30ml
2-8℃
BSA蛋白标准 (5mg/ml BSA)
1ml
-20℃
本试剂盒自订购之日起一年内有效。本试剂盒用于酶标板或者200ul比色皿时可做500孔。当使用2ml比色皿时可做50孔，如果是1ml比色皿时可做100孔。
产品简介
碱性条件下，蛋白将Cu2+还原为Cu+， Cu+与BCA试剂形成紫颜色的络合物，测定其在562nm处的吸收值，并与标准曲线对比，即可计算待测蛋白的浓度。常用浓度的去垢剂SDS，Triton X-100，Tween不影响检测结果，但受螯合剂(EDTA，EGTA)、还原剂（DTT，巯基乙醇）和脂类的影响。实验中，若发现样品稀释液或裂解液本身背景值较高，可试用Bradford蛋白浓度测定试剂盒。
使用说明
一，微孔酶标仪法
1. 配制工作液: 根据标准品和样品数量，按50体积BCA试剂加1体积Cu试剂（50:1）配制成BCA工作液，充分混匀(混合时可能会有浑浊，但混匀后就会消失)。BCA工作液室温24小时内稳定。
2. 稀释标准品：取10微升BSA标准品用PBS稀释至100微升（样品一般可用PBS稀释），使终浓度为0.5mg/ml。将标准品按0, 2, 4，6，8, 12, 16, 20微升加到96孔板的蛋白标准品孔中，加PBS补足到20微升。
3. 将样品作适当稀释（最好多做几个梯度，如作2倍、4倍、8倍稀释），加20微升到96孔板的样品孔中。由于移液器在取小量时的误差，标准线前面的点可能不很准确，所以尽可能的让样品点落在标准线1/2后。
4. 各孔加入200微升BCA工作液，37℃放置15-30分钟。用酶标仪测定A562nm，根据标准曲线计算出蛋白浓度。使用温箱孵育时，应注意防止因水分蒸发影响检测结果。
二，分光光度计法、
如没有酶标仪，可用分光光度计在离心管中混匀后加入比色皿中比色。
步骤如下：
1．配制工作液: 根据标准品和样品数量，按50体积BCA试剂加1体积Cu试剂（50:1）配制成BCA工作液，充分混匀(混合时可能会有浑浊，但混匀后就会消失)。BCA工作液室温24小时内稳定。
2， 稀释标准品：取100微升BSA标准品用PBS稀释至1ml（样品一般可用PBS稀释），使终浓度为0.5mg/ml。
3， 取八支（或者更多）5ml离心管，标让号，按下表加入试剂。
离心管号
1
2
3
4
5
6
7（样品管1）
8（样品管2）
9（样品管3）
标准蛋白BSA
0
40ul
80ul
120ul
160ul
200ul
200ul适当稀释的样品1
200ul适当稀释的样品2
……
PBS
200ul
160ul
120ul
80ul
40ul
0
0
0
0
BCA工作液
2ml
2ml
2ml
2ml
2ml
2ml
2ml
2ml
4， 37℃放置15-30分钟。用分光光度计测562nm处吸光值，根据标准曲线计算出蛋白浓度。
