检测认证人脉交流通讯录
- 1.简介
Charm® MRLBLTET快速检测条，利用免疫原理，运用ROSAÒ侧流技术（快速一步检测），快速检测牛奶中的β-内酰胺和四环素残留，包括氨苄西林、阿莫西林、头孢乙腈、头孢氨苄、头孢洛宁、头孢唑啉、头孢哌酮、头孢喹诺、头孢噻夫及其代谢物、头孢呋肟、头孢匹林、氯唑西林、双氯西林和青霉素G以及四环素族中的金霉素、土霉素和四环素。检测限为2ppb，符合欧盟MRL标准，可应用于奶站、养殖户、实验室、田间和检控人员。
l 反应原理
CHARM ROSA抗生素残留快速检测仪包括抗生素检测条、孵育器和读数仪，主要根据竞争性受体-配体免疫反应进行检测（受体是细胞在进化过程中形成的细胞蛋白组分，能识别周围环境中某种微量化学物质；配体是能与受体特异性结合的物质）。检测条具有两条俘获带，其中一条为检测带（T，由配体组成），另一条为控制带（C）。当样品与被标记的受体混合后，受体将在俘获带上被俘获，并显出红色，随后可以通过反应后俘获带颜色的深浅来判定结果。
2.产品性能
灵敏度 详见表1：
抗生素残留
灵敏度（ppb）
欧盟MRL标准（ppb）
Beta-lactam Drug Beta内酰胺类
Amoxicillin 阿莫西林
2.5
4
Ampicillin 氨苄西林
2.5
4
Cefacetrile 头孢乙腈
6
125
Cefalexin 头孢氨苄
15
100
Cefalonium 头孢洛宁
3
20
Cefazolin 头孢唑啉
8
50
Cefoperazone 头孢哌酮
4
50
Cefquinome 头孢喹诺
15
20
Ceftiofur and Metabolite 头孢噻呋及其代谢物
10
100
Cefuroxime 头孢呋肟
2
50
Cephapirin 头孢匹林
4
60
Cloxacillin 氯唑西林
25
30
Dicloxacillin 双氯西林
20
30
Penicillin G 青霉素G
2
4
Tetracycline Drug 四环素类
Chlortetracycline 金霉素
50
100
Oxytetracycline 土霉素
50
100
Tetracycline 四环素
10
100
交叉反应
以下兽药残留在100ppb时不会干扰检测：氨基糖苷类、酰胺醇类、氟喹诺酮类、大环内酯类/林可胺类、硝基呋喃类、四环素、磺胺类或氯噻嗪、地塞米松、安乃近、呋喃苯胺酸、伊佛霉素、新生霉素、催产素、对氨基苯甲酸、苯基丁氮酮、三氯噻嗪和噻苯咪唑。其他β-内酰胺和四环素可以被检测到：萘夫西林50-70ppb，苯唑西林40-60ppb，哌拉西林3-5ppb。体细胞浓度为106SCC/ml或细菌浓度为3´105CFU/g时不会干扰检测。
3．试剂盒组份及另需的材料
试剂盒组份
另需的材料
耗材
设备
MRLBLTET检测条：100条
MRLBLTET / TET阳性质控：5片
用户手册
枪头
ROSA 孵育器（56℃）
ROSA 读数仪
打印机（可选）
300 μL 移液器（可选）
4. 试剂制备和储存
将试剂盒保存在0-7℃条件下，不要冷冻！
l 检测条
保存在密封的箔罐中，每次检测前取出所需数量的检测条后，将箔罐密封好重新放回冰箱。
避免保存在高湿度条件下。箔罐中有一包防潮剂，正常情况下，防潮剂中颗粒呈蓝色，若颗粒变为紫色或红色时则说明湿度太高，检测条已经变质。
检测条在室温条件下可保存12小时。
l 阴性质控
使用β-内酰胺和四环素阴性牛奶作为阴性质控，它不仅可用于性能监控，还可用于溶解阳性质控片。
冷藏下，阴性质控可储存72小时。
l 阳性质控
未水化时和试剂条一样干燥低温保存。
用5ml阴性奶溶解阳性质控片，配制成4±0.4ppb青霉素G 和100±20ppb土霉素阳性质控液，冰浴放置备用，用前振荡混匀。
阳性质控可在冷藏条件下保存48小时。
l 样品和质控液的长期储存
样品检测需在奶挤出5天内进行。样品可分成小份（至少为0.5ml）放在小瓶中冷冻，冷冻的样品在£－15℃温度下可保存2个月。
如需长时间保存复原的质控物，在复原6小时内分装（1mL）冷冻保存，－15℃或更低温可保存1个月。
解冻的样品（或阳性质控）置于冰水中振荡融化。解冻后的样品冷藏下可储存24小时。注意如果出现蛋白沉淀，则弃用。解冻后的样品检测前需1200g ± 200离心3分钟。冷却，使用脱脂牛奶进行检测。
解冻的样品未用完的请丢弃，不要再冷冻。
解冻后的阳性质控使用前不需要离心。
脱。
5.注意事项
1) 高脂肪样品（＞6.5%）会导致无效结果。不要将无效的检测条插入读数仪。
2) 检测条上的碎片影响读数仪光学性能，因此在将检测条插入读数仪前，应擦去检测条上的灰尘和牛奶残渣,保持设备清洁。
3) ROSA孵育器应保持清洁和水平，温度应设定在56 ± 1℃。暂时不用时放低孵育器盖子，但不要锁定。
4) 因室温不同，ROSA孵育器达到适合的温度需要10分钟左右。
5) 如果样品为冷冻奶、复原奶或含沉淀物的牛奶，检测前应1200±200g离心2min，使用脱脂奶进行检测。低脂奶可增加检测灵敏度。
6) 请勿使用全脂巴氏杀菌奶进行检测。
6.实验流程
l 仪器准备
1) 开启孵育器电源，稍等至温度到达56±1℃。
2) 开启读数仪，1.08.2或更低版本的读数仪调整至MRL频道；1.09.00或更高版本调到TETR频道的3-line模式。
l 检测步骤
1) 取出牛奶待检样品，摇匀。
2) 将检测条放置在孵育器的槽中，在检测条上标记样品编号。
3) 小心将粘箔撕开，至指示线处。
4) 用移液器取300μl 牛奶样品，竖直缓慢滴加至检测条两侧任意一侧的凹槽中。将粘箔粘回。
5) 盖上孵育器塑料盖，自动开始倒计时。
6) 8分钟孵育结束后，蜂鸣器响动。打开塑料盖，取出检测条，不要挤压塑料泡处。
7) 目视或通过读数仪判读结果。
7.结果分析
l 目测筛选
目测对比质控线（BL/TE）和检测线（T）的色差。若两条检测线中有一条或者两条颜色均浅于质控线，或检测线未出现，则说明结果为阳性；若检测线颜色与质控线相当或深于质控线，则说明结果为阴性；若质控线未出现，质控线模糊或不均匀，BL线、TE线或质控线模糊，则说明结果不可用，需要重新进行检测。
l 读数仪结果读取及分析
将检测条凸槽向下水平插入读数仪中，读取MRL频道的结果。若需要，进入SAMPLE 或OPERATOR并点击“ENTER”键，8秒内将会出现结果。
如果屏幕上READING结果出现阴性的英文“RESULT NEGATIVE”字样，样品为阴性。点击“Enter”键，读取阴性或阳性结果。
若出现阳性结果，建议重新进行检测以确定结果。
l 阳性样品重新检测
1) 初步检测为阳性的样品（复样）需用同一个阴性质控和阳性质控重新检测。
2) 阴性质控的结果应为Result：Negative，READING少于-400。
3) 阳性质控的结果应为Result：Positive，READING大于+400。
4) 如果任一质控的结果不在范围之内，需重新进行上述检测。如果结果仍不在范围之内，请放弃，与我们联系。
5) 如果两个质控的结果都在范围之内，并且重新检测的阳性结果中任一或全部为Result：Positive，那么样品可判定为β-内酰胺或四环素阳性。
