制备型电泳 AE-6750S 用途 蛋白质的分离•回收 从细胞•菌中分离目标蛋白 从混合溶液中分离目标蛋白 新发现蛋白质的回收 要求分离能力时 必须的难溶性物质为表面活性剂时 DNA的分离•回收 限制性酶片段的回收 PCR产物的回收 Prepforesis S制备电泳系统的特长 ·回收部分的构造最大限度的防止污染(特长一) ·特有的回收方式「断续-空气置换送液方式」(特长二) ·利用聚丙酰胺的高分离效果(优于层析的分离效果) ·自动控制,操作简单 ·电泳槽,电源,泵,冷却用热交换器,控制部分一体化设计 特长的详细介绍 回收部的构造 传统的制备电泳装置,回收部使用透析膜区分下部电泳缓冲液和目标成分,但目标成分会在电场作用下吸附在透析膜上,引起污染.而AE-6750S的回收部设计成两个圆柱凝胶上下相挟的空间形式.通电后,电泳泳动分离出的目的成分溶于回收部中填充的回收液中.但目的成分不会吸附在回收部下部的凝胶上. 「断续-空气置换送液方式」 传统的制备电泳分离装置中,在电场的作用下,目的成分会吸附在回收部下部的透析膜上,所以必须使回收液连续快速流动来回收目的成分.所以目的成分会被回收液稀释. AE-6750采用的是回收液非循环方式.回收时,电泳也一同停止,回收液经泵送至收集器回收,同时,向回收部注入一段时间空气,使回收部保持空的状态.回收完成后,再由泵注入新的回收液,所以这一划时代的先进方法被称为「断续-空气置换送液方式」.因为无需使用太多回收液,所以最大限度的防止目的成分被稀释. 制备电泳Prepforesis S 的操作流程如下: 根据预备电泳(垂直板电泳)的条带判定是否能分离 ① 预备电泳: ↓ 判定可以分离时,摸索确定分离条件 样品浓度(分离的最适浓度和最后确认实验时的必须浓度) 凝胶浓度(参考预备电泳,摸索分离时的最适浓度) 电泳条件 ↓ ② Prepforesis S 进行样品分离前,必须进行以下工作 泳动准备 样品,圆柱凝胶,缓冲液,回收液的配置 安装电泳槽及电泳缓冲液的预备恒温 分离条件的设定 向配管及回收部中添加回收液 添加样品 ↓ ③ 开始自动分离: 添加样品后,按照设定的条件进行自动分离,回收 ↓ ④ 分离成分确认: 经制备电泳Prepforesis S系统回收的分离成分,用Mini垂直板电泳或用活性测定来确认 ↓ 目的成分可以确认时,该分离成分可以用于活性测定,质量分析等后续实验 主要技术指标: 圆柱胶的体积: 内径 16 mm/ 长 8mm 支架/胶浓度:PAGE胶 6% - 20% 样品量:2.0 mg (质量) / 2.0 ml (体积) 回收部体积:0.8 ml 缓冲液量:1000 ml 循环泵流量:650 ml/分钟 (泵工作时间 1–999分钟) 分离时间:1–999 分钟 (1 分钟 / 档) 收集器输出信号:MAKE接点/open collector 400 ms (step式信号) 15mA 电源输出:恒定电流 5 mA , 10mA , 15mA , 20 mA , 25mA , 30mA , 40mA可变换输出(梯度、程序);异常输出自检功能 条件设定:输出电流值 / 延迟时间 / 分离循环中的泳动通电时间 / 溶液回收时间/回收溶液充填时间 / 分离阶段数 使用温度范围:5 - 65℃ 控制内容显示:荧光LED显示板 40 行 × 20 字 尺寸 质量:260 (w) × 380 (l) × 420 (h) mm 11Kg 大鼠肌肉抽提物经制备电泳Prepforesis S系统,用SDS-PAGE分离回收 (制备电泳Prepforesis S的电泳条件) 样品:大鼠肌肉抽提物 浓缩胶组成:4.5%PAGE Tris-HCL-SDS 缓冲液( pH 6.8 ) 分离胶组成:12.5%PAGE Tris-HCL-SDS 缓冲液( pH8.8 ) 分离胶长:20 mm 电泳用缓冲液:Tris-Gly-SDS 缓冲液 回收用缓冲液:Tris-HCL 缓冲液( pH8.8 ),20%蔗糖 回收液量:0.8 ml / 组分 分画时间:5 分钟 通电:15 mA恒定电流 泳动时间:10 小时 缓冲液温度:20℃ |