检测认证人脉交流通讯录
- 活细菌/死细菌双染试剂盒
SYTO 9活细菌/死细菌双染试剂盒的工作原理在于：SYTO 9和PI的光谱特征以及穿透健康细菌细胞的能力不同。单独使用时，SYTO 9能对群体内的所有细菌进行标记—具有完整膜和受损膜的细菌；相反，PI只能渗透进入受损的膜，PI的插入会引起SYTO 9染色荧光的降低，当体系内加入两种染料时。因此，通过适量比例的SYTO 9和PI的混合染色，具有完整膜结构的细菌呈绿色荧光，而具受损膜结构的细菌呈红色荧光。两者染料的最大激发和发射波长分别是480/500nm（SYTO 9）和 490/635nm（PI）。背景基本无荧光。本试剂盒兼容于荧光显微镜，荧光光度计、荧光酶标仪、流式细胞仪或其它荧光检测仪器。
染色条件的优化：
试剂盒内的两种染料都经过平衡优化，按照1：1的比例进行混合用于绝大多数的样本都能得到良好的区分活/死细菌。偶然情况下，两种染料的混合比例需根据实际需求进行优化调整。比如：在待检样本中，绿色荧光太突出，建议要么降低SYTO 9浓度，要么提高PI浓度。
为了全面优化染色条件，建议测试梯度浓度的SYTO 9，每一种浓度与梯度浓度的PI进行组合染色。建议按照1ml细菌悬液加入3?l不同混合比率的染料预混液。
[注]：SYTO 9 +PI 对细菌的染色请按照说明书建议的15min来操作，不要超过30min。 SYTO 9有很好的细菌渗透性，我们给的实验条件都是优化过。 SYTO 9只有在哺乳动物细胞染色，可能会延长染色时间到120min。
由于染的是活菌+死菌的比例，请染色后尽快观察，不要超过1h。 另，染色后基本是不用清洗的，除非觉得背景荧光很高，就是非细菌的菌体部分都能看到荧光，才有必要简单清洗一次。
三、荧光显微镜操作步骤：
活菌和死菌的荧光可能用标准的荧光素长通滤片设置来同时观察。替代方案的话，活菌（绿色荧光）和死菌（红色荧光）可分别用荧光素和Texas Red带通滤光片设置。用于本试剂盒检测的建议荧光显微镜滤片设置。
http://www.shujibio.com/Products-38641004.html
https://www.chem17.com/st326659/erlist_2527117.html
