传统的荧光活化细胞分选方法(FACS)采用流式细胞术用来分选细胞,是分子基础分选中普遍使用的方法。这种方法只能检测具有荧光活性的细胞,不但细胞存活率低、纯度低,而且极易破坏细胞组织。CellSorter 全自动细胞分选仪,是一款与倒置显微镜配合使用的,用于细胞筛选、提取、沉积的理想设备。该系统可以灵活的与各种类倒置显微镜配合,安装操作也非常简单。如果用户已经拥有自己的显微镜系统,只需购买标准配件就可以将现有的系统升级为一套多功能的细胞分选平台。
系统优势
Ø 可直接从培养皿中进行细胞分选
Ø 分离粘结活细胞的细胞亚群,分离荧光或者冷光标记
Ø 无标记的和荧光的细胞都可通过软件进行自动识别
Ø 可确保细胞分离后活力,并且可培养
Ø 分选荧光分子探针标记的特定细胞
Ø 单细胞收集进行进一步培养、克隆,RNA或者蛋白质制备
Ø 免疫制备,进行目标细胞分类
Ø 可对各种粘结细胞进行分类
Ø 细胞筛选前的细胞培养
Ø 一般的分选过程只需几分钟就可完成
Ø 使用安装在显微镜上的荧光滤片可实现多通道监测
Ø 分选速度:1Cell/秒 每一个循环可筛选细胞个数:1~1000全自动细胞分选仪配备高精度微移液管支架,控制台始终保证微量吸液管位于视场的正中心, 并且微移液管控制台可非常容易地安装在物镜上,同时软件可对移液管的位置进行偏差校准。
微移液管的尖端可通过转动控制台的旋钮进行手动聚焦,且微移液管的尖端科在显微镜中非常容易的被观察到,同时显微镜的图像可跟进调整; 玻璃微移液管更换非常便捷,当更换培养皿时简单地取下来分选针头即可。
设备特点
Ø 兼容所有的倒置显微镜
Ø 快速手动调节通过LED照明光源
Ø 分选针头更换快速、便捷
Ø 可通过连接环完美的安装到显微镜的物镜上
自动单细胞沉积功能:
* 单细胞输送到达每一个PCR管
* 滴液体积小于1ul
* 一个循环可装满80个PCR管
* 每个Cell沉积时间15~20秒
* 可在一个玻璃盖玻片上原位测试单个细胞沉积
CellSorter微量吸液管非自动化的细胞沉积平台
a. 微量吸液管的路径。
在一个典型的分类过程中,可根据路径对细胞进行逐个提取,有200个细胞从培养皿中被提取。比例尺:100μm。
b. 硬件仿真模拟的控制软件。
在虚拟的培养皿中,荧光细胞被标记为绿色小球,通过微量吸液管对细胞进行提取。
c. 微量吸液管定位装置微量吸液管布局图。
控制台通过物镜环固定在物镜上方,玻璃微量吸液管被固定在控制台中心光轴位置。微量吸液管顶端通过LED灯照射,照射光通过微量吸液管直接被引入到物镜。微量吸液管尖端可通过手动调节弹簧旋钮上下移动到物镜焦点位置。培养皿可以进行水平移动,微量吸 液管上端通过挠性导管连接到注射泵上。
计算机控制单元
全自动细胞分选仪控制台可通过计算机USB接口控制流体阀和显微LED照明光源,同时也可以自由地控制显微镜荧光快门,并且整合了高速控制阀实现流体快速、精密控制。
注射泵
全自动细胞分析仪标准配置注射泵型号为NE-1000
Ø简易键盘操作界面
Ø最大可装配一个60cc的注射器
Ø输液率:0.73μL/小时(1cc注射器)到2100ml/小时(60cc注射器)
* 其他规格的泵也可以整合在该设备中使用。
玻璃微移液管
全自动细胞分析仪使用微量吸液管对细胞进行分选,微量吸液管内孔径范围为50~80um;
可根据客户的应用提供最优的内孔径方案;更小的微移液管可达亚微米级,用于大分子的操纵。
自动单细胞沉积到PCR管
Ø 可将单细胞移动到每一个PCR管中
Ø 一个循环可填满10PCR条,容纳80个管
Ø 盖玻片单细胞原位沉积试验
Ø 最小滴定体积优于1ul
Ø 15~20秒每个细胞
单细胞提取
图a为盖玻片上15个NE-4C单细胞培养基滴液,通过显微镜观测,滴液间距为5mm。滴液体积大约为0.74 ±0.03 μl。
相位对比图b和荧光图c是滴液中一个完整的细胞。通过排序筛选后出现在小滴液中显示为相位对比和荧光两种模式,箭头位置为滴液中的细胞。
相差(b)和(c)的荧光图像单个细胞完整无损。在下降。在排序过程中细胞检测的小滴在两相衬和荧光模式。箭头指向细胞在一个下降。
细胞损伤
3T3细胞培养图a和提取后图b。图a中4个细胞用白框进行标注;图b中注意箭头所指位置为细胞突残留在表面。在这个排序中只有这4个以外的一个细胞存活了。
微量吸液管的孔径截面图列在图a左下角。比例尺:100mm
细胞存活
NE-4C(图a)和3T3(图c)细胞培养前,细胞排序后图b、d。顶面板显示培养出的细胞和分选后底部面板,分选的细胞用白框标注。图e显示细胞分选2小时后的存活状况:NE-4C细胞左列为4个NE-4C以外的3个幸存细胞的相衬显微镜图;右列为同样的细胞通过亚甲蓝染色后通过203物镜捕捉到的图像。3T3细胞左列为3个幸存细胞图像,培养细胞在分选前用胰岛素—EDTA预处理过。微量吸液管的孔径截面图列在图a右上角。所有图像比例尺:100mm,明视场e图像比例尺为:25mm