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HPLC：

服务简介

高效液相色谱（High Performance Liquid Chromatography -- HPLC）又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。高效液相色谱是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。该方法已成为化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中重要的分离分析技术应用。

本台高效液相色谱（HPLC）LC-20A在充实基本性能的同时，确立了高度对应网络要求的综合管理系统，一元化管理数据与装置，实现了分析的高效率

服务参数

本台高效液相色谱输液单元， Prominence 20AT，

输液方式：串联双柱塞；

梯度系统，梯度方式：低压混合 ，混合溶剂数：最多4液；

紫外可见检测器 ，光源： D2灯；

自动进样器 Prominence SIL-20A。

检测项目

高效液相色谱（HPLC）用于有机物的定量。

样品要求

可根据实际样品提供具体的样品前处理方案。

结果示例

1、乙二醇含量测试

2、18种氨基酸含量测试

常见问题及解答

1. 测试高效液相为什么需要先和测试经理沟通？

HPLC可选因素太多，检测器条件，色谱柱条件，流动相条件都可以改变出峰时间。

2. 测试为什么需要标准品？

无论是定性还是定量都需要用标准品来鉴别，作为标准来衡量。

3. 没有任何信息可以做HPLC吗？

可以的，这就是涉及了方法开发，耗时会久一点。

LCMS：

服务简介

   Thermo ScientificTM Q ExactiveTM 高性能台式四极杆—轨道阱LC-MS/MS系统，是首台将四极杆的母离子选择性和高分辨率精确质量(HR/AM)OrbitrapTM 质量分析相结合的商业化仪器，旨在提供高度可靠的定量和定性(quan/qual)工作流程。

   Q ExactiveTM 质谱仪具有创新的HR/AM QuanfirmationTM 功能，能够在单次分析中鉴定、定量和确认复杂混合物中更多痕量级的代谢物、污染物、肽类和蛋白质。与其它技术不同的是，该系统能够在不影响MS/MS灵敏度、质量分辨率或定量重现性的情况下，获得极其可靠的分析结果。

   Q Exactive高性能台式四极杆—轨道阱LC-MS/MS系统具有如下意义非凡的创新设计，大大扩展了Thermo Scientific Exactive家族Orbitrap系统的功能：

　　· 集成式四极杆质量过滤器实现前体离子选择性。在Orbitrap HR/AM检测之前，MS/MS碎裂过程发生在能量更高的碰撞诱导解离(HCD)池中;

　　· 新型C-Trap离子光学系统和HCD碰撞池提供了快速HCD MS/MS扫描并改善了低质量数离子的传递，从而提高灵敏度和定量性能，尤其适用于使用同位素标签的实验;

　　· 多重检测提高了整体系统工作周期的效率，能够更好的与UHPLC兼容，并在Orbitrap进行同时检测之前收集并保存多种母离子。

 

服务参数

技术参数：

1. ESI/APCI源；

2. 分辨率：140,000 FWHM( m/z≤200)

3. 质量范围50-6000m/z

4.高分辨质谱采集速率：最高12Hz

5. 超快速二元高压泵

6. 二极管阵列检测器

 

检测项目

1．药物分析和药代动力学研究；
2．环境污染物及其产物分析； 
3．天然产物分析； 
4．未知物结构分析；

5.蛋白分子量测定。

样品要求

液体1ml以上，固体5mg以上

常见问题及解答

LC-MS样品如何预处理？

1. 样品中不得含有强酸、强碱，如含有上述物质，需进行处理，以保证批pH值在2~7.5之间。样品中不得含有硼氢化钠，对于加入甲醇后会产生强碱的体系(如有氢钠)的样品请务必在送样前进行处理。 2. 如果体系中含有大量的无机盐，需要进行处理，以防止无机盐析出，堵塞分析柱。同时大量的无机盐存在会污染质谱离子源部分，甚至影响样品的信号。 3. 如果反应体系中使用了一些质谱信号响应十分强的物质，如：三乙胺，四丁基溴化铵，三苯基氧磷等，送样前请进行处理，尽量减少此类物质在样品中的残留，以避免造成目标物质质谱信号的抑制。 4. 对于应用了金属类催化剂（如钯类催化剂）的反应体系时，请务必进行处理后再送样。这类金属催化剂往往很容易在LCMS分析体系内残留，质谱信号非常强，将严重影响后面样品的正常测试。 5. 测试样品中要尽量避免含有紫外吸收比较强的溶剂，如：苯，甲苯，吡啶等。 6. 对于监控反应的样品（如反应液或用乙酸乙酯，二氯，三氯萃取后的反应液，过柱用烷烃溶剂等）取适量后用甲醇，乙腈等稀释到适当浓度。 7. 发货或纯度测定的样品尽可能的用色谱级的甲醇，乙腈，水溶解；如果这些溶剂的溶解性不好，可用较好溶的溶剂先溶解后再用色谱甲醇，乙腈稀释到合适的浓度；另外，有些发货的样品需要用220nm，可用DMSO或DMF溶样（发货样品尽量避免含有乙酸乙酯，二氯等溶剂），然后再用色谱甲醇，乙腈稀释到合适的浓度，因为这两个溶剂的峰保留时间短，不会与样品峰重叠。发货样品送固体的请注明所需溶剂。 8. 被测样品或样品中含有剧毒物质或刺激性气味，请注意，实验员务必要标示清楚并告知分析员，以便采取防护措施。 9. 样品必须经过0.22um的过滤器过滤（过滤后样品必须澄清，无絮状物），否则不予测试。

送样量及样品处理有什么要求吗？

1. 对于已经纯化的样品，最好去除溶剂，用点样毛细管沾取少量放入样品管，并稀释至0.5mL，用0.22μm的滤器过滤即可。 2. 对于反应体系样品，如果在薄层上点一下，斑点即很清晰，说明浓度适中，取0.2mL放入样品样管，稀释至0.5mL，用0.22μm的滤器过滤即可。 3. 如果需要点多次才能在薄层上见到，就需要酌情增加。 4. 样品浓度特别小或特别大的请及时向分析员说明。 反应液需用2ml离心管，切忌使用其它离心管或样品管。要选择能完全溶解样品的溶剂，稀释处理后的样品需要澄清。浓度过小或过大要备注说明。

如何判断样品是不是可以做LCMS

可以查询相关文献，或者样品相关的检测信息，一般的化合物，代谢产物，降解产物都是可以测试的。

数据如何解析

我们实验室有专业的解析老师，需要解析可以跟项目经理联系，根据不同解析服务进行报价。

LCMS可以进行定量实验吗 ？

可以的，需要标准品。LCMS定量比一般的检测要灵敏。

服务案例

1.  300多种多酚含量组成测定

2. 18种单糖组成测试